麥康凱瓊脂培養(yǎng)基介紹
更新時間:2025-05-07 瀏覽次數(shù):51
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkey Agar,MAC)全面解析
一、基本介紹
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性及鑒別性培養(yǎng)基,由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制,主要用于腸道致病菌的分離與鑒定。其核心設(shè)計邏輯為:
選擇性抑制:通過膽鹽抑制革蘭氏陽性菌(如葡萄球菌、鏈球菌),但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長;
鑒別功能:利用乳糖發(fā)酵差異,通過指示劑顏色區(qū)分細菌代謝特性。
二、核心成分與配方
成分 | 作用機制 |
---|---|
蛋白胨、脙胨 | 提供碳源、氮源、維生素及生長因子,支持細菌基礎(chǔ)代謝。 |
膽鹽(豬/牛/羊) | 抑制革蘭氏陽性菌,但對沙門氏菌、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。 |
乳糖 | 作為發(fā)酵底物,分解產(chǎn)酸(如大腸埃希菌)或不分解(如沙門氏菌)。 |
中性紅 | pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸時菌落呈桃紅色,并形成膽鹽沉淀環(huán)。 |
結(jié)晶紫 | 增強對革蘭氏陽性菌(如腸球菌、葡萄球菌)的抑制,減少干擾。 |
氯化鈉 | 維持滲透壓平衡,確保細菌正常生長。 |
瓊脂 | 凝固劑,形成固體培養(yǎng)基表面。 |
典型配方(每升):
蛋白胨 20g、乳糖 10g、氯化鈉 5g、膽鹽 5g、中性紅 0.03g、瓊脂 14g,pH 7.2±0.2。
三、作用機制與鑒別原理
選擇性抑制:
膽鹽破壞革蘭氏陽性菌細胞膜,抑制其生長;
結(jié)晶紫進一步增強對腸球菌和葡萄球菌的抑制,但沙門氏菌等腸道菌可耐受。
乳糖發(fā)酵鑒別:
發(fā)酵乳糖菌(如大腸埃希菌):產(chǎn)酸使菌落呈桃紅色,周圍形成膽鹽沉淀環(huán)(因酸與膽鹽反應)。
不發(fā)酵乳糖菌(如沙門氏菌、志賀氏菌):菌落無色或淡黃色,無沉淀環(huán)。
遲緩發(fā)酵菌(如宋內(nèi)志賀氏菌):菌落中心偏紅,邊緣無色。
四、應用場景
臨床檢驗:
糞便、分泌物中腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌)的分離;
腸球菌的篩選與鑒定。
科研應用:
耐藥菌株篩選(如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌);
菌株融合研究(如通過抗藥性標記篩選融合菌株)。
特殊改良配方:
低鹽MAC:減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長;
山梨醇MAC:替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌(不發(fā)酵山梨醇);
含抗生素MAC:添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌。
五、制備方法
配制:
稱取54g培養(yǎng)基干粉溶于1L蒸餾水,加熱煮沸至溶解。
滅菌:
分裝后121℃高壓滅菌15分鐘,滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。
傾注平板:
冷卻至50-55℃時加入滅菌的結(jié)晶紫和中性紅溶液,混勻后傾注平板。
六、使用注意事項
樣本處理:
糞便、分泌物等可直接接種,固體樣本需稀釋后涂布。
培養(yǎng)條件:
35-37℃培養(yǎng)18-24小時,觀察菌落顏色與形態(tài)。
結(jié)果解讀:
結(jié)合生化試驗(如吲哚試驗、氧化酶試驗)和血清學試驗進一步鑒定。
局限性:
某些特殊需求菌株(如嚴格厭氧菌)可能無法生長;
需定期驗證培養(yǎng)基性能(如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗證選擇性)。
七、總結(jié)
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基通過膽鹽抑制與乳糖發(fā)酵指示,實現(xiàn)了對腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調(diào)、用途廣泛,是臨床微生物檢驗和科研中的工具。隨著研究深入,改良配方不斷拓展其應用場景,為微生物學研究提供了有力支持。
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